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LC-MS

La cromatografía líquida–espectrometría de masas (LC-MS) combina una separación por cromatografía líquida con detección basada en masa. Suele considerarse cuando la separación por sí sola no aporta selectividad suficiente o cuando la información de masa molecular puede reforzar la respuesta analítica.

La LC separa los compuestos antes de que lleguen al espectrómetro de masas; este mide los iones según su relación masa-carga. Esta combinación puede servir para mezclas complejas, cuantificación dirigida, cribado y análisis que requieren evidencia más sólida sobre un analito que la proporcionada por un detector óptico convencional. Thermo Fisher Scientific: información sobre LC-MS 🔗

La parte LC utiliza bombas, un inyector, una columna y una fase móvil, de forma similar a HPLC. En la interfaz, las moléculas se convierten en iones en fase gaseosa. El analizador de masas separa los iones por su relación masa-carga y el detector registra la señal. En espectrometría de masas en tándem, pueden fragmentarse iones seleccionados para obtener evidencia estructural adicional.

ComponenteFunción en el proceso
Sistema LC y columnaSeparan la muestra antes de la detección de masas.
Fuente de ionizaciónProduce iones en fase gaseosa a partir del efluente LC.
Analizador de masasSepara los iones según su relación masa-carga.
Detector y sistema de datosRegistran señales y permiten su tratamiento, revisión e informe.
Sistemas de gas, vacío y extracciónPermiten transmitir los iones y operar con seguridad.

LC-MS no es automáticamente una versión mejor de HPLC. Añade otro tipo de información y un entorno operativo más exigente. Puede ser valiosa cuando la complejidad de la muestra, los analitos a baja concentración o la confianza en la identidad hacen pertinente la detección basada en masa. Puede ser innecesaria si un método HPLC bien establecido y su detector ya responden la pregunta de forma fiable.

Consulte HPLC frente a LC-MS para comparar ambos procesos, selección de detectores HPLC si se consideran detectores ópticos u otros, y HPLC para los fundamentos de la separación.

Cuando esté clara la evidencia necesaria, use el mapa de líneas de productos LC-MS para distinguir plataformas de cuadrupolo simple, triple cuadrupolo, alta resolución y procesos especializados antes de comparar sistemas.

La ionización debe ser viable antes de que las especificaciones del analizador sean útiles. Fuentes de ionización LC-MS compara ESI, APCI, APPI y opciones de bajo caudal según el analito, la fase móvil, el caudal y la matriz. Triple cuadrupolo frente a QTOF y Orbitrap distingue después la cuantificación dirigida, el cribado de masa exacta y las preguntas sobre datos estructurales.

Un sistema LC-MS integra la parte LC, la fuente de ionización, el analizador, el software, los archivos de métodos, los consumibles y las prácticas de servicio. Al evaluar un cambio, examine todo el entorno operativo y no el analizador de masas de forma aislada. Consulte Agilent, Waters, Thermo Fisher Scientific y Shimadzu en relación con la base de conocimientos LC-MS actual.

Aspectos que considerar antes de la adopción

Sección titulada «Aspectos que considerar antes de la adopción»
  • Pregunta y evidencia: Defina si necesita separación, cuantificación, confirmación de identidad, cribado o información estructural.
  • Ionización y compatibilidad de la fase móvil: Los analitos y disolventes deben ser compatibles con la fuente y las condiciones del método.
  • Efectos de matriz: El material que coeluye puede afectar la respuesta iónica, por lo que siguen siendo importantes la preparación y la separación.
  • Estrategia de datos: Planifique cómo se tratarán, revisarán, conservarán y compararán los datos con patrones o materiales de referencia.
  • Infraestructura operativa: Considere gases, ventilación o extracción, residuos, soporte del sistema de vacío, personal formado y respuesta del servicio.

Antes de una compra o transferencia de método

Sección titulada «Antes de una compra o transferencia de método»

Documente los analitos, matrices, intervalo de concentración previsto, capacidad de procesamiento y tipo de evidencia requerida en el informe. Pregunte si el laboratorio puede mantener limpios la trayectoria LC y la fuente, controlar cambios del método e investigar variaciones de sensibilidad o exactitud de masa. No seleccione un sistema solo por su intervalo de masas; su adecuación depende de todo el proceso.

El rendimiento LC-MS depende de fases móviles adecuadas, muestras limpias, contaminación controlada y comprobaciones definidas para el método y el instrumento. La limpieza de la fuente, las comprobaciones de ajuste o calibración y el mantenimiento del vacío dependen del modelo y deben seguir las instrucciones vigentes del fabricante y los procedimientos controlados del laboratorio. Por ejemplo, un manual oficial de Thermo Fisher exige apagar y ventear antes de retirar y limpiar la interfaz. Thermo Fisher Scientific: manual de mantenimiento Orbitrap Astral Zoom 🔗

El sistema puede incluir alta tensión, superficies calientes, gases comprimidos, hardware de vacío, disolventes y residuos químicos. Una explicación general no sustituye el manual, las fichas de seguridad ni el procedimiento del laboratorio.